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厭氧培養(yǎng)--微生物厭氧培養(yǎng)
1.可利用厭氧產(chǎn)氣袋法進行厭氧培養(yǎng)。
規(guī)格2.5L的產(chǎn)氣袋只能將2.5L容積內(nèi)的氧氣*吸收,轉(zhuǎn)化成二氧化碳,同理,3,5L的產(chǎn)氣袋能吸收3.5L容積的氧氣。微需要產(chǎn)氣袋和二氧化碳產(chǎn)氣袋亦是如此,為達到相應(yīng)的氧氣濃度和二氧化碳濃度,不僅容積要固定,放置的培養(yǎng)物數(shù)量也基本要裝滿,在出廠前都根據(jù)計算設(shè)定好了的,所以,培養(yǎng)也需要在設(shè)定的條件下進行。
厭氧培養(yǎng)罐有兩種規(guī)格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容納12只9cm標準培養(yǎng)皿),配套使用1只2.5L規(guī)格的厭氧產(chǎn)氣袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容納42只9cm標準培養(yǎng)皿),配套使用3只2.5L規(guī)格的厭氧產(chǎn)氣袋或者2只3.5L的厭氧產(chǎn)氣袋。兩種都是長方體,原廠的產(chǎn)氣袋培養(yǎng)后不會產(chǎn)生負壓,直接可以打開,所以不需要泄壓孔。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內(nèi)在半小時內(nèi)造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達厭氧狀態(tài),可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止上*的培養(yǎng)厭氧菌儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內(nèi)進行操作,故名。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關(guān)上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開,將物品移入箱內(nèi),關(guān)上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調(diào)節(jié)溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預(yù)還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動調(diào)節(jié)。